富血小板纤维蛋白提取液对牙周膜成纤维细胞成骨能力影响的实验研究

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近日，烟台市口腔医院研究人员发表论文，旨在探讨富血小板纤维蛋白提取液（Platelet-richfibrinextract，PRFe）对牙周膜成纤维细胞（PeriodontalligamentcellPDLC）增殖、成骨分化的影响，以期为富血小板纤维蛋白在临床的应用提供理论基础。研究指出，PRFe能有效地促进牙周膜成纤维细胞的增殖活性及成骨分化。该文发表在2014年第02期《中国口腔种植学杂志》上。

实验分为实验组（P组）和对照组（D组），P组使用含PRFe的α-MEM成骨诱导培养液（10%胎牛血清、青霉素100mg/L、链霉素100mg/L、10-2mol/Lβ-甘油磷酸钠、10-7mol/L地塞米松、5mg/L抗坏血酸）培养细胞，D组则使用不含PRFe的α-MEM成骨诱导培养液。甲基噻唑基四唑（MTT）法测定1d、3d、5d的细胞增殖数；碱性磷酸酶（ALP）活性检测1d、3d、5d的成骨分化情况；荧光实时定量PCR测定Runx2mRNA和OCNmRNA基因分别在3d、7d的表达。

MTT显示：随培养时间延长，细胞数量逐渐增加，在各时间点，P组细胞的吸光度值（1d：0.235±0.012，3d：0.270±0.014，5d：0.686±0.040）均明显高于D组（1d：0.201±0.011，3d：0.286±0.020，5d：0.426±0.024），差异有统计学意义（P<0.05）。ALP活性：随着培养时间延长而增加，P组的增加更为显著，在各时间点，P组的吸光度值（1d：0.124±0.018，3d：0.176±0.013，5d：0.361±0.021）均显著大于D组（1d：0.103±0.011，3d：0.123±0.012，5d：0.162±0.014），差异有统计学意义（P<0.05）。荧光实时定量PCR：随着培养时间延长，两组细胞的基因表达量逐渐增加，将D组3d时基因表达水平定义为1，进行组内标准化，P组细胞的Runx2和OCN基因表达量（3d时分别为1.751±0.136，1.510±0.129；7d时分别为2.287±0.165，2.103±0.042）显著高于D组（3d时两个基因均为1；7d时分别为：1.367±0.121，1.208±0.051），差异有统计学意义（P<0.05）。

(实习编辑：徐润兰）

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